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      1. 食品伙伴網(wǎng)服務(wù)號(hào)

        【深度分析】不同方法對(duì)微生物檢測(cè)菌落蔓延的影響

        放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2022-12-13
        核心提示: 在食品微生物檢測(cè)過程中,菌落總數(shù)檢測(cè)常常受到微生物菌落蔓延的影響,造成結(jié)果準(zhǔn)確度下降甚至無法得到檢測(cè)結(jié)果,食品菌落
         在食品微生物檢測(cè)過程中,菌落總數(shù)檢測(cè)常常受到微生物菌落蔓延的影響,造成結(jié)果準(zhǔn)確度下降甚至無法得到檢測(cè)結(jié)果,食品菌落總數(shù)測(cè)定結(jié)果就無法真實(shí)地表現(xiàn)出食品的衛(wèi)生狀況。為減少菌落蔓延的影響,本文通過對(duì)5種減少或防止菌落蔓延方法進(jìn)行的測(cè)試研究,我們一起來學(xué)習(xí)一下吧!


         

        1材料與試劑

         

        1.1 食品檢樣

        巴氏消毒牛奶、原味面包


        1.2 儀器

        全自動(dòng)菌落分析儀

        立式壓力蒸汽滅菌器

        生化培養(yǎng)箱

        均質(zhì)機(jī)

        恒溫水浴鍋

        培養(yǎng)皿(直徑90mm)


        1.3 試劑

        瓊脂

        平板計(jì)數(shù)瓊脂(PCA)

        氯代三苯基四氮唑(TTC)


         

        2 方法

         

        首先將購買的巴氏消毒牛奶和面包放置使它們過期,牛奶過期 8h,面包過期96h,通過過期處理有助于菌落蔓延的形成。整個(gè)檢驗(yàn)步驟按照國家標(biāo)準(zhǔn) GB 4789.2-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn)菌落總數(shù)測(cè)定》(以下簡(jiǎn)稱國標(biāo))進(jìn)行。每種樣品做10-2、10-3、10-4,3個(gè)連續(xù)稀釋度,每個(gè)稀釋度每組做12個(gè)檢驗(yàn)平板、2個(gè)空白平板。


        2.1 對(duì)照組

        按照國標(biāo)正常檢測(cè),制成檢驗(yàn)培養(yǎng)基平板后培養(yǎng)基不加覆蓋。


        2.2 加覆蓋組

        按照國標(biāo)法制作檢驗(yàn)平板后,加入 5 mL 滅菌培養(yǎng)基覆蓋住原培養(yǎng)基。采用兩種不同的覆蓋方案,加覆蓋組一是檢驗(yàn)平板做好后,加入的覆蓋培養(yǎng)基的瓊脂質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.0%(配方:瓊脂 20g,水 98g),加覆蓋組二瓊脂含量質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4.0%(配方:瓊脂40g,水960g)。


        2.3 加濾紙組

        培養(yǎng)皿滅菌前在培養(yǎng)皿皿蓋中放置兩層濾紙,目的是在菌落總數(shù)檢測(cè)培養(yǎng)的過程中可以吸收一定量的冷凝水,防止微生物細(xì)胞或孢子隨著冷凝水遷移,減少菌落蔓延的發(fā)生,然后按照國標(biāo)法制作不加覆蓋的平板。


        2.4 加 TTC 組

        每 100 mLPCA 培養(yǎng)基中加人0.1%TTC溶液2.5mL混勻,按照國標(biāo)法制作不加覆蓋的平板。TTC 染色液能夠使菌落呈現(xiàn)紅色而培養(yǎng)基和食品殘?jiān)w粒不會(huì)被染色,有利于菌落計(jì)數(shù)時(shí)真實(shí)菌落的鑒別,且不會(huì)對(duì)微生物特別是細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖造成影響。


         

        3 結(jié)果

         

        將制成的平板翻轉(zhuǎn),36 ℃培養(yǎng) 48 h。首先計(jì)數(shù)不同組別、不同稀釋度檢驗(yàn)平板菌落蔓延情況,然后使用全自動(dòng)菌落分析儀計(jì)數(shù)不同稀釋度不蔓延平板的微生物菌落數(shù)量,空白平板均無菌落生長(zhǎng)。根據(jù)檢測(cè)結(jié)果分別統(tǒng)計(jì)過期牛奶的菌落蔓延情況、過期面包菌落蔓延情況和過期牛奶面包的菌落總數(shù)檢驗(yàn)情況,制成表1~表3。


        3.1 過期巴氏消毒牛奶不同組別、不同稀釋度菌落蔓 延情況統(tǒng)計(jì)

        過期巴氏消毒牛奶不同組別、不同稀釋度菌落蔓延情況統(tǒng)計(jì)見表 1。

        3.2 過期面包不同組別、不同稀釋度菌落蔓延情況統(tǒng)計(jì)

        過期面包不同組別、不同稀釋度菌落蔓延情況統(tǒng)計(jì)見表 2。

         

        3.3 菌落總數(shù)檢測(cè)結(jié)果

        菌落總數(shù)檢測(cè)結(jié)果見表 3。

        從以上3.1過期巴氏消毒牛奶不同組別、不同稀釋度菌落蔓延情況統(tǒng)計(jì)表和3.2過期面包不同組別、不同稀釋度菌落蔓延情況統(tǒng)計(jì)表中可以看出不經(jīng)過處理的對(duì)照組平板,菌落蔓延非常嚴(yán)重,巴氏消毒牛奶和面包分別達(dá)到了77.8%、94.4%;加TTC組菌落蔓延也很嚴(yán)重,均達(dá)到了75.0%,與對(duì)照組相比有所改善;加濾紙組菌落蔓延分別達(dá)到了69.4%和75.0%,菌落蔓延對(duì)檢驗(yàn)的影響也較大;加覆蓋組一菌落蔓延分別達(dá)到了38.9%、44.4%,對(duì)菌落蔓延有較好的抑制作用,可以保證檢驗(yàn)得到結(jié)果;加覆蓋組二菌落蔓延分別達(dá)到了25.0%、27.8%,菌落蔓延的到了較好的控制,是防止菌落蔓延所有試驗(yàn)方法中最佳的。


        對(duì) 3.3 菌落總數(shù)檢測(cè)結(jié)果分析:以過期巴氏消毒牛奶為例:對(duì)照組、加 TTC組、加濾紙組、加覆蓋組一、加覆蓋組二平均菌落數(shù)分別為91000、91000、87000、89000、80000 CFU/mL,各組得到的數(shù)據(jù)相差不大,對(duì)食品檢驗(yàn)的最后報(bào)告不會(huì)造成實(shí)際的影響,說明檢驗(yàn)過程中通過一定的方法防止菌落蔓延對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響較小,可以在實(shí)際工作中采用。分析過期面包的檢驗(yàn)結(jié)果可以得到同樣的結(jié)論。

         

         

        4 討論

        控制菌落蔓延在食品微生物檢測(cè)中非常重要,面包、饅頭、蛋糕、米粉、餅干等多種食品在檢驗(yàn)過程中容易出現(xiàn)菌落蔓延情況,其他食品的檢驗(yàn)也會(huì)或多或少出現(xiàn),對(duì)檢驗(yàn)工作造成困擾。加覆蓋組二對(duì)菌落蔓延的抑制作用很明顯,相比對(duì)照組平均下降52.8%和66.6%;加覆蓋組一的效果也不錯(cuò),相比對(duì)照組平均下降38.9%和50.0%。


        同一種食品采用不同的配方、加工工藝、不同的溫度對(duì)微生物的影響不同,檢測(cè)的結(jié)果也有不同。本次研究的食品試驗(yàn)材料只有2種,相對(duì)較少;同時(shí)受到配置稀釋液時(shí)間等限制,不可能一次做大量平板,對(duì)研究結(jié)果造成一定影響,結(jié)論僅供參考。

        編輯:songjiajie2010

         
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