名稱

機(jī)制

轉(zhuǎn)染效率

用途

優(yōu)缺點(diǎn)

影響因素

磷酸鈣轉(zhuǎn)染法

內(nèi)吞作用

20%細(xì)胞被轉(zhuǎn)染

瞬時(shí)表達(dá)

1、簡(jiǎn)單有效

2、適用于貼壁、非貼壁細(xì)胞

　　3、常作首選方法

1、Ca2 ，DNA濃度

2、PH值，沉淀反應(yīng)時(shí)間

　　3、氯喹，甘油和丁酸鈉處理

DEAE葡聚糖轉(zhuǎn)染法

抑制核酸酶

內(nèi)吞作用

在BDC-1，CV-1和COS細(xì)胞中較高

瞬時(shí)表達(dá)

操作簡(jiǎn)單

1、需高濃度DNa

2、DEAE葡聚糖濃度

　　3、溫育時(shí)間

Poly-brene轉(zhuǎn)染法

不清楚

低分子量DNA轉(zhuǎn)染率高于磷酸鈣法

CHO細(xì)胞的穩(wěn)定轉(zhuǎn)化子

能得到較多的穩(wěn)定轉(zhuǎn)化子

1、受體細(xì)胞類型

2、轉(zhuǎn)染調(diào)控信號(hào)

　　3、DNA濃度

原生質(zhì)體融合

胞膜融合

50-100%轉(zhuǎn)染，穩(wěn)定子得率為0.2-0.02%

瞬時(shí)表達(dá)

穩(wěn)定表達(dá)

1、操作復(fù)雜

2、不能進(jìn)行共轉(zhuǎn)染

　　3、慎用于篩選營(yíng)養(yǎng)缺陷型變異株

1、溶菌酶、PEG濃度

2、溫育時(shí)間

電穿孔

高壓在膜上形成微孔

效率較高

瞬時(shí)表達(dá)

穩(wěn)定轉(zhuǎn)化

1、需精密儀器

2、可用于動(dòng)物、植物細(xì)胞和細(xì)菌

1、電場(chǎng)強(qiáng)度

2、脈沖長(zhǎng)度

　　3、溫度，DNA濃度

　　4、培養(yǎng)液

脂質(zhì)體

脂膜融合

50-60%轉(zhuǎn)染

瞬時(shí)表達(dá)

穩(wěn)定轉(zhuǎn)化

1、操作簡(jiǎn)單

2、可用于體內(nèi)試驗(yàn)

1、脂質(zhì)體質(zhì)量

2、DNA濃度

胞核微注射法

直接注射

50-100%轉(zhuǎn)染

穩(wěn)定轉(zhuǎn)化

1、需要特殊儀器

2、處理樣品數(shù)量少

　　3、高效

1、注射技術(shù)

2、DNA濃度