1）核DNA和線粒體DNA

1．當(dāng)細(xì)胞培養(yǎng)到約107細(xì)胞/ml時，離心（5秒）收集細(xì)胞，再懸浮在70％乙醇中。

2．固定5分鐘或5分鐘以上，用水洗2次。

3．將細(xì)胞懸浮在含有50ng/ml的4，6-二脒基-2苯基吲哚的封固劑中。1mg/ml的4，6-二脒基-2苯基吲哚母液可在－20℃下貯存。

4．用紫外濾片觀察。

2）線粒體

1．在生長培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)胞達(dá)到約107細(xì)胞/ml時，加入100ng/ml 3，3’-二已基噁羰花青碘化物（DiOC6，Sigma D3652或Molecular Probes）用乙醇把1mg/ml母液稀釋到1/104。

2．培養(yǎng)5分鐘或5分鐘以上，用熒光素濾片觀察。

3）液泡

1．當(dāng)細(xì)胞生長到約107細(xì)胞/ml時，離心收集細(xì)胞（5秒），懸浮在含有50mmol/L檸檬酸鈉（pH4.0）的YPD中。

2．加CDCFDA（羧基-2’,7’-二氯-熒光素雙乙酸鹽）到終濃度為10μmol/L。

3．保溫10分鐘或10分鐘以上，用熒光濾片觀察。

4）牙痕和幾丁質(zhì)

1．用生長培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞達(dá)107細(xì)胞/ml時，加100μg/ml Calcofluor（熒光發(fā)光劑28；Sigma F3543）（用水將1mg/ml母液稀釋到1/10，母液可在－20℃下黑暗保存數(shù)星期）。

2．培養(yǎng)5分鐘或5分鐘以上，用水洗2次，用紫外濾片觀察。