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移液槍是實驗操作上不可缺少的工具，對于頂尖高手而言，重要的就是實驗的誤差最小，重復(fù)再現(xiàn)性好，那就要注意正確移液槍使用。
移液槍的分類和工作原理
氣體活塞式移液槍
工作原理：通過彈簧的伸縮運動，推動活塞，排除部分空氣，利用大氣壓吸入液體，再由活塞推動空氣排除液體。
塞式移液槍
工作原理：通過分液管或吸頭內(nèi)活塞的連續(xù)運動移取和打出液體，活塞和液體直接接觸，沒有空氣柱，適用于密度、黏度與水不同的液體，如易揮發(fā)性溶液、粘稠液體等。
移液槍使用訣竅
氣體活塞式移液槍
1影響移液槍精度因素
(1)溫度：室溫低時，手溫較高，使得空氣膨脹，吸入冷溶液時往往發(fā)生誤差。
(2)氣密性：吸頭和槍體的結(jié)合部，以及槍內(nèi)柱體之間的長期磨損，造成誤差。
(3)吸速：容易造成吸頭內(nèi)氣泡產(chǎn)生，而且會污染槍頭。
(4)試劑的揮發(fā)：吸揮發(fā)性高的試劑時，蒸汽進入槍頭，內(nèi)壓增高，結(jié)果在壓出液體時，壓力變大，而產(chǎn)生誤差。解決辦法：反復(fù)抽吸4-5次就可改善。
2具體使用方法
更換tip法：最精確。
(1)調(diào)節(jié)旋鈕到所需刻度位置，訣竅：首先可略超過一些，再回旋至刻度。注意禁止超過最大刻度，避免人為誤差。
(2)插上tip:無菌操作時，要注意動作迅速正確，不能用手碰tip，動作的力度要保持一致，禁止廢動作。普通操作時，可用拇指食指上緊，但手不能碰tip尖端處。
(3)指壓到第一段，tip尖端接觸試劑。白色tip進到液面1 mm一下，黃色吸頭 2-3 mm，藍色吸頭2-4 mm，避免液壓的影響造成的誤差。
(4)緩慢吸試劑，禁止速度過快，液體進入槍頭。
(5)移出吸頭后，先在容器內(nèi)壁輕輕靠住，使吸頭外壁液體流下。
(6)將吸頭貼在目標容器內(nèi)壁，輕輕按到第一段，壓出液體。
(7)吸頭尖端在容器內(nèi)壁略上滑動，保留尖端少量液體，移出目標容器，手指卸掉吸頭，注意不要使試劑濺出。
一只吸頭分注法：不適用于揮發(fā)性，有毒性試劑。
(1)同上述A-D，移出液面后，先緩慢按到第一段，在用力按到第二段，將試劑全壓出。
(2)同上述C，緩慢吸出液體。
(3)在目標容器液體上空，壓出試劑到第二段，注意壓的力度要和A相同，還應(yīng)注意試劑不要四處飛濺。
(4)緩慢返回第一段，可重復(fù)上述操作。達到目標容器原有液體不污染吸頭的目的。
轉(zhuǎn)移數(shù)ul的貴重試劑時的方法：
(1)同上述A-D，移出液面后，在容器內(nèi)壁輕按幾下，使外壁液體流下。白色吸頭進到液面1 mm以下，這最重要。
(2)tip尖端浸入目標容器的液面下，緩慢壓到第一段。
(3)松開，返回到第一段，重新吸入液體，反復(fù)4-5次，，洗凈吸頭內(nèi)壁液體。
(4)將吸頭尖端移出液面，在內(nèi)壁輕輕靠住，壓出液體到第二段。
移液槍使用注意事項，要注意以下幾點：
1. 正確選擇移液槍與吸頭組合量程
空氣柱的體積越小，誤差越低。
2. 吸頭的浸沒深度
吸頭盡量浸沒得淺一些，防止液體殘留在吸頭表面，但是同時要浸沒得足夠深防止吸取空氣。
3. 垂直吸取液體
移液時角度不同，液體壓力也會改變。
4. 預(yù)潤濕
通過預(yù)潤濕，使得空氣柱充滿飽和的液體分子，至少預(yù)潤濕3次，使得空氣柱里的液體分子達到飽和。
5. 正確的放液操作
放液時，吸頭尖靠在容器內(nèi)壁，完全打出，排出最后的液滴;體積低于10ul直接放液到容器底部。
6. 緩慢、勻速的吸放液體，保證結(jié)果的精確性。
移液六部曲
1. 裝吸頭
移液器套柄用力下壓，需要時小幅度旋轉(zhuǎn)即可。
錯誤操作：用力敲擊吸頭。此方法會帶來吸頭損壞甚至移液器套柄磨損，從而影響其密封性。
2. 量程設(shè)定
操作之前請先選擇正確的移液器，移液器可在10-100%量程范圍內(nèi)操作，但在10%量程處操作對于移液技巧要求高，故推薦在35-100%量程范圍內(nèi)操作。
量程調(diào)節(jié)：當由小量程調(diào)節(jié)至大量程時，朝所需量程方向連貫旋轉(zhuǎn)，旋轉(zhuǎn)到達超過所需量程1/3圈處再回調(diào)至所需量程。當由大量程調(diào)節(jié)至小量程時，直接連貫旋轉(zhuǎn)至所需量程。
3. 潤洗
用同一樣品重復(fù)吸液排液二至三次，潤洗為以后每次吸液提供相同的接觸面，保證操作的一致性。
注意：高溫或者低溫液體請不要潤洗!
4. 吸頭浸入角度
吸液時盡量保持垂直狀態(tài)，傾斜角度不能超過20°。
5. 吸頭浸入深度：0.1-10ul:1-2mm、10-200ul:2-3mm、200-2000ul:3-6mm、over2000ul：6-10mm。
6. 吸頭浸入時間
吸液后在液面中保持一秒鐘再將吸頭平緩移開，這對于大容量移液器或者吸取粘性樣品尤為重要。
7. 吸液速度
勻速連貫移液，控制好移液速度，太快會造成噴液，液體或者氣霧沖入移液器內(nèi)部，污染活塞等部件。
8. 排液及吹液
先將活塞按至第一檔排液，略作停頓后按至第二檔進行吹液。
排液四種方式：沿內(nèi)壁、在液面以上、在液體表面、液面下。
9. 手溫
移液器不宜長時間握在手里，不用時最好將其掛在支架上或者掛在手上晾一下。
移液槍的維護保養(yǎng)
一
密封性檢查
1.儀器測漏
2.簡單目測法
1)200uL及以下的移液器，吸液后將吸頭浸入液面1-2mm，靜待20秒，觀察吸頭內(nèi)部液面是否下降。
2)1000uL以上的移液器，吸液后將吸頭移出液面，朝下垂直靜置15-20秒，觀察是否有液體下滴。
二
移液器的清洗方式
外部清潔：
日常清潔劑(專業(yè)清洗劑，肥皂液，洗潔精等)擦洗，然后用純水淋洗，晾干即可 。
內(nèi)部清潔：
1)下半部分拆卸下來。
2)塑料部件(套柄等)采用與外部清潔一致的方式即可。
3)活塞清潔可用純水(或先用異丙醇沖洗再用純水洗凈)，晾干， 然后在活塞表面用棉簽涂上一層薄薄的硅酮油脂。
注：移液器主體密封部分，大多是免維護的，不能輕易拆卸。
二
移液器的故障分析解決
文章（文字）來源：網(wǎng)絡(luò)
移液槍的分類和工作原理
氣體活塞式移液槍
工作原理：通過彈簧的伸縮運動，推動活塞，排除部分空氣，利用大氣壓吸入液體，再由活塞推動空氣排除液體。
塞式移液槍
工作原理：通過分液管或吸頭內(nèi)活塞的連續(xù)運動移取和打出液體，活塞和液體直接接觸，沒有空氣柱，適用于密度、黏度與水不同的液體，如易揮發(fā)性溶液、粘稠液體等。
移液槍使用訣竅
氣體活塞式移液槍
1影響移液槍精度因素
(1)溫度：室溫低時，手溫較高，使得空氣膨脹，吸入冷溶液時往往發(fā)生誤差。
(2)氣密性：吸頭和槍體的結(jié)合部，以及槍內(nèi)柱體之間的長期磨損，造成誤差。
(3)吸速：容易造成吸頭內(nèi)氣泡產(chǎn)生，而且會污染槍頭。
(4)試劑的揮發(fā)：吸揮發(fā)性高的試劑時，蒸汽進入槍頭，內(nèi)壓增高，結(jié)果在壓出液體時，壓力變大，而產(chǎn)生誤差。解決辦法：反復(fù)抽吸4-5次就可改善。
2具體使用方法
更換tip法：最精確。
(1)調(diào)節(jié)旋鈕到所需刻度位置，訣竅：首先可略超過一些，再回旋至刻度。注意禁止超過最大刻度，避免人為誤差。
(2)插上tip:無菌操作時，要注意動作迅速正確，不能用手碰tip，動作的力度要保持一致，禁止廢動作。普通操作時，可用拇指食指上緊，但手不能碰tip尖端處。
(3)指壓到第一段，tip尖端接觸試劑。白色tip進到液面1 mm一下，黃色吸頭 2-3 mm，藍色吸頭2-4 mm，避免液壓的影響造成的誤差。
(4)緩慢吸試劑，禁止速度過快，液體進入槍頭。
(5)移出吸頭后，先在容器內(nèi)壁輕輕靠住，使吸頭外壁液體流下。
(6)將吸頭貼在目標容器內(nèi)壁，輕輕按到第一段，壓出液體。
(7)吸頭尖端在容器內(nèi)壁略上滑動，保留尖端少量液體，移出目標容器，手指卸掉吸頭，注意不要使試劑濺出。
一只吸頭分注法：不適用于揮發(fā)性，有毒性試劑。
(1)同上述A-D，移出液面后，先緩慢按到第一段，在用力按到第二段，將試劑全壓出。
(2)同上述C，緩慢吸出液體。
(3)在目標容器液體上空，壓出試劑到第二段，注意壓的力度要和A相同，還應(yīng)注意試劑不要四處飛濺。
(4)緩慢返回第一段，可重復(fù)上述操作。達到目標容器原有液體不污染吸頭的目的。
轉(zhuǎn)移數(shù)ul的貴重試劑時的方法：
(1)同上述A-D，移出液面后，在容器內(nèi)壁輕按幾下，使外壁液體流下。白色吸頭進到液面1 mm以下，這最重要。
(2)tip尖端浸入目標容器的液面下，緩慢壓到第一段。
(3)松開，返回到第一段，重新吸入液體，反復(fù)4-5次，，洗凈吸頭內(nèi)壁液體。
(4)將吸頭尖端移出液面，在內(nèi)壁輕輕靠住，壓出液體到第二段。
移液槍使用注意事項，要注意以下幾點：
1. 正確選擇移液槍與吸頭組合量程
空氣柱的體積越小，誤差越低。
2. 吸頭的浸沒深度
吸頭盡量浸沒得淺一些，防止液體殘留在吸頭表面，但是同時要浸沒得足夠深防止吸取空氣。
3. 垂直吸取液體
移液時角度不同，液體壓力也會改變。
4. 預(yù)潤濕
通過預(yù)潤濕，使得空氣柱充滿飽和的液體分子，至少預(yù)潤濕3次，使得空氣柱里的液體分子達到飽和。
5. 正確的放液操作
放液時，吸頭尖靠在容器內(nèi)壁，完全打出，排出最后的液滴;體積低于10ul直接放液到容器底部。
6. 緩慢、勻速的吸放液體，保證結(jié)果的精確性。
移液六部曲
1. 裝吸頭
移液器套柄用力下壓，需要時小幅度旋轉(zhuǎn)即可。
錯誤操作：用力敲擊吸頭。此方法會帶來吸頭損壞甚至移液器套柄磨損，從而影響其密封性。
2. 量程設(shè)定
操作之前請先選擇正確的移液器，移液器可在10-100%量程范圍內(nèi)操作，但在10%量程處操作對于移液技巧要求高，故推薦在35-100%量程范圍內(nèi)操作。
量程調(diào)節(jié)：當由小量程調(diào)節(jié)至大量程時，朝所需量程方向連貫旋轉(zhuǎn)，旋轉(zhuǎn)到達超過所需量程1/3圈處再回調(diào)至所需量程。當由大量程調(diào)節(jié)至小量程時，直接連貫旋轉(zhuǎn)至所需量程。
3. 潤洗
用同一樣品重復(fù)吸液排液二至三次，潤洗為以后每次吸液提供相同的接觸面，保證操作的一致性。
注意：高溫或者低溫液體請不要潤洗!
4. 吸頭浸入角度
吸液時盡量保持垂直狀態(tài)，傾斜角度不能超過20°。
5. 吸頭浸入深度：0.1-10ul:1-2mm、10-200ul:2-3mm、200-2000ul:3-6mm、over2000ul：6-10mm。
6. 吸頭浸入時間
吸液后在液面中保持一秒鐘再將吸頭平緩移開，這對于大容量移液器或者吸取粘性樣品尤為重要。
7. 吸液速度
勻速連貫移液，控制好移液速度，太快會造成噴液，液體或者氣霧沖入移液器內(nèi)部，污染活塞等部件。
8. 排液及吹液
先將活塞按至第一檔排液，略作停頓后按至第二檔進行吹液。
排液四種方式：沿內(nèi)壁、在液面以上、在液體表面、液面下。
9. 手溫
移液器不宜長時間握在手里，不用時最好將其掛在支架上或者掛在手上晾一下。
移液槍的維護保養(yǎng)
一
密封性檢查
1.儀器測漏
2.簡單目測法
1)200uL及以下的移液器，吸液后將吸頭浸入液面1-2mm，靜待20秒，觀察吸頭內(nèi)部液面是否下降。
2)1000uL以上的移液器，吸液后將吸頭移出液面，朝下垂直靜置15-20秒，觀察是否有液體下滴。
二
移液器的清洗方式
外部清潔：
日常清潔劑(專業(yè)清洗劑，肥皂液，洗潔精等)擦洗，然后用純水淋洗，晾干即可 。
內(nèi)部清潔：
1)下半部分拆卸下來。
2)塑料部件(套柄等)采用與外部清潔一致的方式即可。
3)活塞清潔可用純水(或先用異丙醇沖洗再用純水洗凈)，晾干， 然后在活塞表面用棉簽涂上一層薄薄的硅酮油脂。
注：移液器主體密封部分，大多是免維護的，不能輕易拆卸。
二
移液器的故障分析解決
|
問題 |
可能原因 |
解決方法 |
|
吸頭漏液或分液體積不準確 |
吸頭松脫或吸頭不匹配 |
插緊吸頭；更換匹配的吸頭 |
|
移取粘稠、易揮發(fā)性或與水密度有明顯差異的液體 |
預(yù)潤濕吸頭數(shù)次 |
|
|
移液過快 |
緩慢移動控制按鈕，慢吸慢放 |
|
|
吸頭離開液面過快 |
在液面下停留3秒鐘，再緩慢移出吸頭 |
|
|
活塞被污染或損壞 |
清潔或更換活塞 |
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|
移液槍吸嘴損壞 |
更換移液槍下半部分零件或通道 |
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|
控制按鈕移動困難，發(fā)澀。 |
活塞被污染 密封圈污染 移液槍堵塞 |
清潔移液槍下半部分 更換過濾芯 |
|
安裝吸頭時吸嘴無彈性伸縮 |
鎖定環(huán)取消了彈簧加載 |
取下鎖定環(huán) |
文章（文字）來源：網(wǎng)絡(luò)
